大蛇丸首先是隐藏在药师兜的身体里，当药师兜被击败后，左助唤醒了大蛇丸，并带到宇智波一族的禁地，用秘术解开了死神封印的手，把四代火影的灵魂也解放了，顺带用秽土转生召唤了1-4代的火影，其中三代火影猿飞日斩也因此出现与大蛇丸联手，拯救木叶。